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真菌毒素的胶体金快速检测:原理与操作规范

更新时间:2026-01-14   点击次数:30次
真菌毒素是真菌在生长繁殖过程中产生的有毒代谢产物,部分种类(如 呕吐毒素)可引发人体急性或慢性中毒,严重威胁食品安全。胶体金免疫层析法凭借快速、简便、无需专业设备的优势,可在 30 分钟内完成真菌毒素初筛,是现场监测与基层食安筛查的理想方法。

一、适用范围

本方法适用于粮食、油料、饲料及各类加工食品中呕吐毒素等真菌毒素的快速定性筛查,检测结果可作为是否需要进一步实验室定量检测的依据。

二、检测原理

试纸卡基于竞争法胶体金免疫层析技术设计,核心反应过程如下:
  1. 将处理后的样品检测液滴入试纸卡样品孔,液体会沿层析膜向检测区扩散;

  2. 检测液中的真菌毒素会与金标垫上的金标抗体特异性结合,形成 “毒素 - 金标抗体" 复合物;

  3. 阳性结果:若检测液中毒素浓度高于检出限,金标抗体将全部与毒素结合,无法在检测线(T 线)处与包被抗原结合,试纸仅出现质控线(C 线),无可见 T 线;

  4. 阴性结果:若检测液中毒素浓度低于检出限,部分金标抗体未与毒素结合,会在 T 线处与包被抗原结合,形成可见的红色 T 线,同时 C 线正常显色(C 线显色证明试纸有效)。

核心检出限

  • 呕吐毒素:≤100ng/mL

三、简易操作步骤

  1. 样品处理:固体样品(如粮食)取 2~5g 研磨均匀,按试剂盒要求加入提取液,振荡 5~10 分钟后静置,取上清液作为检测液;液体样品可直接取上清或按比例稀释后检测。

  2. 加样检测:将试纸卡平放,用滴管吸取检测液,缓慢滴加 3~5 滴至样品孔中。

  3. 结果观察:室温下静置 10~15 分钟(最长不超过 30 分钟),在白色背景下观察试纸条显色情况,超过 30 分钟的结果无效。

四、结果判定与注意事项

(一)结果判定标准

试纸显色情况结果判定说明
C 线显色,T 线不显色阳性样品中毒素浓度≥检出限,需送实验室定量检测
C 线显色,T 线显色阴性样品中毒素浓度<检出限
C 线不显色(无论 T 线是否显色)无效试纸失效或操作不当,需重新检测

(二)关键注意事项

  1. 试纸卡需密封储存于2~30℃阴凉干燥处,避免阳光直射、高温高湿环境,使用前核对保质期。

  2. 样品处理需充分,固体样品研磨要均匀,提取振荡时间需达标,否则会导致毒素提取不充分,出现假阴性。

  3. 检测液需澄清无杂质,若有浑浊需过滤后再使用,防止堵塞层析膜影响结果。

  4. 胶体金检测仅为定性初筛,阳性样品需送实验室采用高效液相色谱法等国标方法进行精准定量


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